日立120kV TEM HT7800
透射電子顯微鏡（TEM）是觀察病毒形態(tài)的最佳工具。日立透射電鏡HT7800有高反差和高分辨兩種模式，能同時(shí)兼顧生物組織的大視野觀察和病毒的高分辨觀察。其 Specimen Search （自動(dòng)顆粒搜索功能）可以自動(dòng)尋找病毒顆粒，并進(jìn)行記錄統(tǒng)計(jì)。
病毒是一種沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的特殊生物。它們的結(jié)構(gòu)非常簡(jiǎn)單，由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成。病毒不能獨(dú)立生存，必須生活在其他生物的細(xì)胞內(nèi)，一旦離開活細(xì)胞可就不表現(xiàn)任何生命活動(dòng)跡象。病毒個(gè)體極其微小，光學(xué)顯微鏡由于可見光波長(zhǎng)的限制，只能看到某些病毒的包涵體，絕大多數(shù)的病毒要在電子顯微鏡下才能看到。透射電鏡觀察病毒有兩種方式，第一種是在超薄切片中觀察被感染細(xì)胞內(nèi)病毒的形狀、大小、排列及其組裝、成熟過程過程的形態(tài)特征；第二種是將病毒進(jìn)行分離純化，使用磷鎢酸、醋酸鈾等電子致密物對(duì)病毒進(jìn)行負(fù)染，觀察病毒的超微結(jié)構(gòu)。
Vero細(xì)胞內(nèi)的HSV病毒（被感染細(xì)胞的組織切片）
例如，單純皰疹病毒（Herpes Simplex Virus，HSV）是皰疹病毒的典型代表，是一種傳染性極高的病毒，在世界各地都很常見。大多數(shù)人在兒童世界就好感染HSV病毒，但是一般情況下HSV都潛伏在神經(jīng)節(jié)里，人體的免疫系統(tǒng)會(huì)一直監(jiān)視著它們。但是在感冒、疲勞、睡眠不足、壓力大、緊張焦慮等因素的影響下，免疫力下降時(shí)，潛伏于體內(nèi)的HSV便會(huì)大量繁殖，導(dǎo)致口腔、嘴角附近起泡發(fā)病，繼而群集、糜爛、結(jié)痂。這個(gè)過程就是我們俗稱的嘴唇起火泡。上圖就是HSV病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制組裝，并穿越細(xì)胞膜的透射電鏡照片。
對(duì)病毒的診斷和研究都離不開電子顯微鏡，透射電鏡是確定各種病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)的最有用工具。
埃博拉病毒
SARS病毒
艾滋病病毒
電鏡負(fù)染技術(shù)是一種快速簡(jiǎn)便的操作程序，也是病毒性致病因子診斷的常用方法，在新病毒的發(fā)現(xiàn)、尋找對(duì)抗新病毒方法的工作中都做出了重要貢獻(xiàn)。而且，在臨床標(biāo)本中病毒粒子數(shù)極少的情況下，電鏡就成為了診斷中最重要的工具。
但是由于病毒的尺寸太小，需要在很高的放大倍數(shù)、視野很小的條件下才能觀察到。在病毒粒子極少時(shí)，就要求測(cè)試人員在樣品中一個(gè)小區(qū)域一個(gè)小區(qū)域的逐步辨識(shí)，并且在有病毒的區(qū)域進(jìn)行拍攝。如果要對(duì)病毒進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，還需要對(duì)整個(gè)有病毒區(qū)域進(jìn)行覆蓋拍攝，并將圖片輸入到專業(yè)的圖像處理軟件中進(jìn)行計(jì)算。過程及其枯燥，且耗時(shí)。
日立透射電鏡HT7800的Specimen Search功能可以為這一問題提供自動(dòng)化的解決方案。我們將病毒樣品放進(jìn)電鏡，輸入目標(biāo)顆粒的尺寸、寬容度等參數(shù)，選擇需要搜索的區(qū)域，再進(jìn)行一些簡(jiǎn)單的設(shè)置，電鏡就可以開始自動(dòng)搜尋并記錄了。
選擇自動(dòng)搜索區(qū)域
自動(dòng)搜索時(shí)可跳過銅網(wǎng)骨架
這一過程實(shí)現(xiàn)了搜索、識(shí)別、拍攝、分析的全自動(dòng)無人值守工作。由于日立電鏡的高穩(wěn)定性，HT7800可以長(zhǎng)時(shí)間聯(lián)系不間斷的運(yùn)行，對(duì)抗病毒工作提供最穩(wěn)定的支持。
自動(dòng)運(yùn)行完成后，我們就可以獲得大量的目標(biāo)顆粒照片和統(tǒng)計(jì)結(jié)果的表格。Specimen Search功能使用最先進(jìn)是識(shí)別算法，即使比冠狀病毒小10倍的蛋白顆粒，也可輕松識(shí)別：
樣品：負(fù)染鐵蛋白顆粒
蛋白顆粒統(tǒng)計(jì)表格
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